Co to jest bakterioskopia i do czego służy

Bakterioskopia jest techniką diagnostyczną, która pozwala szybko i łatwo zidentyfikować występowanie infekcji, ponieważ dzięki specyficznym technikom barwienia możliwe jest zwizualizowanie struktur bakteryjnych pod mikroskopem.

Badanie to można wykonać na dowolnym materiale biologicznym, a lekarz musi wskazać, który materiał należy zebrać i przeanalizować, a wynik wskazuje, czy obecność bakterii została zweryfikowana, czy też nie, a także jej ilość i zwizualizowane cechy..

Po co to jest

Bakterioskopia jest testem diagnostycznym, który można wykonać na dowolnym materiale biologicznym i można go użyć do szybkiej identyfikacji infekcji bakteryjnych:

1. Choroby przenoszone drogą płciową, takich jak rzeżączka i chlamydia, na przykład, do tego celu stosuje się wydzielanie prącia lub pochwy. Kolekcja jest wykonywana przy użyciu sterylnego wacika i jest przeciwwskazane, aby wykonać czyszczenie okolicy narządów płciowych 2 godziny przed badaniem i nie uprawiać seksu w ciągu 24 godzin przed pobraniem;
2. Zapalenie migdałków, ponieważ poprzez gromadzenie wydzieliny w gardle można zidentyfikować bakterie Gram-dodatnie odpowiedzialne za zapalenie w ciele migdałowatym, przy czym zwykle identyfikuje się bakterie typu paciorkowca;
3. Zakażenia układu moczowego, co odbywa się poprzez analizę moczu pierwszego strumienia;
4. Gruźlica, w którym analizowana jest plwocina;
5. Zakażenia ran chirurgicznych, ponieważ często zdarza się, że infekcje występują po operacjach z powodu obniżenia układu odpornościowego danej osoby. W ten sposób pobieranie wydzieliny z rany można oznaczyć sterylnym wacikiem, aby sprawdzić możliwą obecność bakterii w okolicy;
6. Zmiany skórne lub paznokciowe, który polega na pobraniu powierzchownej próbki, wskazanej, aby nie używać kremów i emalii co najmniej 5 dni przed egzaminem. Chociaż można wykonać bakterioskopię, grzyby zwykle obserwuje się na przykład podczas analizy próbki paznokcia.

Ponadto bakterioskopia może być stosowana w celu diagnozowania bakteryjnego zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych, chorób układu oddechowego i żołądkowo-jelitowego i może być wykonana poprzez biopsję lub materiał z okolicy odbytu..

Tak więc bakterioskopia jest techniką laboratoryjną, którą można zastosować w praktyce klinicznej do diagnozowania chorób wywoływanych przez bakterie, wskazując cechy wywołujące chorobę, a tym samym umożliwiając lekarzowi rozpoczęcie leczenia nawet przed identyfikacją w laboratorium, co może potrwać około 1 tygodnia.

Jak to jest zrobione

Badanie bakterioskopowe odbywa się w laboratorium, a materiał pobrany od pacjenta jest analizowany pod mikroskopem w celu zbadania nieobecności lub obecności bakterii, oprócz ich cech.

Przygotowanie do przystąpienia do egzaminu zależy od materiału, który zostanie zebrany i przeanalizowany. W przypadku materiału dopochwowego nie zaleca się, aby kobieta myła 2 godziny przed egzaminem i nie uprawiała seksu w ciągu ostatnich 24 godzin, podczas gdy na przykład w przypadku pobierania materiału z paznokcia lub skóry zaleca się, aby nie przejść szkliwo, kremy lub substancje na skórze przed badaniem.

Na przykład w przypadku próbki wydzieliny z pochwy wymaz, który został użyty do pobrania próbki, przesuwa się okrężnymi ruchami na szkiełku, które należy zidentyfikować za pomocą inicjałów pacjenta, a następnie zabarwić za pomocą Gram. Na przykład w przypadku próbki plwociny, która jest materiałem zbieranym głównie w celu sprawdzenia obecności bakterii odpowiedzialnych za gruźlicę, kolor stosowany w bakterioskopii to kolor Ziehla-Neelsena, który jest bardziej specyficzny dla tego rodzaju mikroorganizmu.

Zwykle po sprawdzeniu obecności bakterii laboratorium przeprowadza identyfikację mikroorganizmu i antybiogramu, dając bardziej kompletny wynik.

Jak powstaje barwienie metodą Grama

Barwienie metodą Grama jest prostą i szybką techniką barwienia, która pozwala bakteriom różnicować się zgodnie z ich cechami, umożliwiając bakteriom różnicowanie się w dodatnie lub ujemne zgodnie z ich kolorem, umożliwiając ich oglądanie pod mikroskopem.

Ta metoda barwienia wykorzystuje dwa główne barwniki, niebieski i różowy, które mogą zabarwić bakterie. Mówi się, że bakterie zabarwione na niebiesko są Gram-dodatnie, a bakterie różowe są nazywane Gram-ujemnymi. Na podstawie tej klasyfikacji lekarz może rozpocząć leczenie zapobiegawcze, nawet przed identyfikacją mikroorganizmu.

Dowiedz się, jak powstaje barwienie metodą Grama

Identyfikacja bakterii za pomocą barwienia metodą Grama jest szybka, praktyczna i niedroga w wykonywaniu, niezbędna dla lekarzy, ponieważ znane są już specyficzne cechy tych grup bakterii, a lekarz może wskazać leczenie zapobiegawcze oparte wyłącznie na barwieniu metodą Grama..

To barwienie opiera się na różnicowaniu bakterii zgodnie z charakterystyką ściany komórkowej. Bakterie Gram-dodatnie mają więcej niż jedną grubą ścianę peptydoglikanu, która jest w stanie dobrze zatrzymać pierwszy barwnik, podczas gdy bakterie Gram-ujemne mają cieńszą ściankę, którą można łatwo odbarwić po wystawieniu na działanie alkoholu..

Barwienie metodą Grama wykonuje się w 5 głównych krokach, ale protokół może się różnić w zależności od laboratorium:

1. Przykryj szkiełko fioletowym barwnikiem krystalicznym i pozwól mu działać przez około 1 minutę;
2. Umyj szkiełko strumieniem bieżącej wody i przykryj szkiełko lugolem, który ma na celu utrwalenie niebieskiego barwnika i pozwól mu działać przez 1 minutę. Oba rodzaje bakterii mogą wchłonąć kompleks utworzony przez barwnik i lugol, zmieniając kolor na niebieski;
3. Następnie umyj szkiełko pod bieżącą wodą i nałóż 95% alkoholu, pozostawiając go na 30 sekund. Alkohol jest odpowiedzialny za rozpuszczenie błony lipidowej, która tworzy bakterie Gram-ujemne, a tym samym usunięcie kompleksu utworzonego między barwnikiem a lugolem, odbarwiając te bakterie. Jednak w przypadku bakterii Gram-dodatnich alkohol odwadnia ścianę komórkową bakterii Gram-dodatnich, a pory kurczą się i stają się nieprzepuszczalne;
4. Następnie ponownie umyj pod bieżącą wodą i przykryj szkiełko drugim barwnikiem, fuksyną lub safraniną i pozwól mu działać przez 30 sekund;
5. Następnie umyj szkiełko pod bieżącą wodą i pozostaw do wyschnięcia w temperaturze pokojowej.

Gdy tylko szkiełko wyschnie, można wlać kroplę olejku immersyjnego i obserwować szkiełko w mikroskopie obiektywem 100x, sprawdzając obecność lub brak bakterii, a także drożdże i komórki nabłonkowe.

Co oznacza wynik

Wynik bakterioskopii ma na celu wskazanie, czy istnieje obecność lub nieobecność mikroorganizmów, cech i ilości, oprócz analizowanego materiału. 

Wynik uważa się za ujemny, gdy mikroorganizmy nie są obserwowane, a dodatni, gdy mikroorganizmy są wizualizowane. Wynik jest zwykle wskazywany przez krzyżyki (+), gdzie 1 + oznacza, że ​​na 100 polach zaobserwowano od 1 do 10 bakterii, co może na przykład wskazywać na początkową infekcję, a 6 + oznacza obecność ponad 1000 bakterii na obserwowane pole, reprezentujące na przykład bardziej przewlekłą infekcję lub oporność bakteryjną, na przykład, wskazując, że leczenie nie jest skuteczne.

Ponadto w raporcie podano zastosowany kolor, którym może być na przykład Gram lub Ziehl-neelsen, oprócz cech mikroorganizmu, takich jak kształt i układ, na przykład w klastrach lub w łańcuchach.

Zwykle, gdy wynik jest pozytywny, laboratorium identyfikuje mikroorganizm i antybiogram, wskazując, który antybiotyk jest najbardziej zalecany w leczeniu infekcji przez określoną bakterię.