Elektroforeza, co to jest, do czego służy i jak to się robi

Elektroforeza jest techniką laboratoryjną wykonywaną w celu oddzielenia cząsteczek według ich wielkości i ładunku elektrycznego, dzięki czemu można postawić diagnozę chorób, zweryfikować ekspresję białka lub zidentyfikować mikroorganizmy.

Elektroforeza to prosta i tania procedura, stosowana w rutynowych badaniach laboratoryjnych i projektach badawczych. Zgodnie z celem elektroforezy może być konieczne przeprowadzenie innych testów i egzaminów w celu ustalenia diagnozy, na przykład.

Po co to jest

Elektroforezę można wykonać do różnych celów, zarówno w projektach badawczych, jak i w diagnozie, ponieważ jest to prosta i tania technika. W ten sposób elektroforezę można wykonać w celu:

• Zidentyfikuj wirusy, grzyby, bakterie i pasożyty, przy czym ta aplikacja jest bardziej popularna w projektach badawczych;
• Test na ojcostwo;
• Sprawdź ekspresję białek;
• Zidentyfikuj mutacje, na przykład przydatne w diagnozowaniu białaczki;
• Przeanalizuj rodzaje krążącej hemoglobiny, przydatne w diagnozowaniu anemii sierpowatej;
• Oceń ilość białek obecnych we krwi.

Zgodnie z celem elektroforezy może być konieczne wykonanie innych uzupełniających testów, aby lekarz mógł ukończyć diagnozę.

Jak to jest zrobione

Aby wykonać elektroforezę, konieczny jest żel, który może być z poliakryloamidu lub agarozy, w zależności od celu, buforu do elektroforezy i kadzi, markera masy cząsteczkowej i barwnika fluorescencyjnego, oprócz sprzętu oświetleniowego UV lub LED, znanego również jako transiluminator.

Po przygotowaniu żelu należy umieścić konkretny przedmiot, aby studzienki zostały wykonane w żelu, popularnie zwanym grzebieniem, i pozostawić żel. Gdy żel będzie gotowy, wystarczy nałożyć substancje na studzienki. W tym celu w jednej ze studzienek należy umieścić marker masy cząsteczkowej, kontrolę dodatnią, czyli znaną substancję, kontrolę ujemną, która gwarantuje prawidłowość reakcji, oraz próbki do analizy. Wszystkie próbki należy zmieszać z barwnikiem fluorescencyjnym, ponieważ w ten sposób można wizualizować pasma na transiluminatorze.

Żel z próbkami należy umieścić w kadzi do elektroforezy, która zawiera specyficzny roztwór buforowy, a następnie urządzenie zostaje włączone, aby uzyskać prąd elektryczny, a co za tym idzie różnicę potencjałów, która jest ważna dla rozdziału cząstki zgodnie z ich ładunkiem i rozmiarem. Czas działania elektroforetycznego zmienia się zgodnie z celem procedury i może trwać do 1 godziny.

Po wyznaczonym czasie można zobaczyć wynik przebiegu elektroforetycznego przez transiluminator. Gdy żel zostanie umieszczony w świetle UV lub LED, możliwe jest zwizualizowanie wzoru pasmowania: im większa cząsteczka, tym mniejsza jej migracja, zbliżenie się do studni, a im lżejsza cząsteczka, tym większy potencjał migracyjny.

Aby reakcja została zatwierdzona, konieczne jest zwizualizowanie pasm kontroli dodatniej i że w kontroli ujemnej nic nie jest wizualizowane, ponieważ w przeciwnym razie jest to wskazanie, że nastąpiło zanieczyszczenie, a cały proces należy powtórzyć.

Rodzaje elektroforezy

Elektroforezę można przeprowadzić do różnych celów i zgodnie z jej celem można zastosować kilka rodzajów żelu, z których najczęściej są poliakryloamid i agaroza..

Elektroforeza w celu identyfikacji mikroorganizmów jest częściej wykonywana w laboratoriach badawczych, jednak do celów diagnostycznych elektroforeza może być stosowana do identyfikowania chorób hematologicznych i chorób, które ewoluują wraz ze wzrostem ilości białek, będących głównymi rodzajami elektroforezy :

1. Elektroforeza hemoglobiny

Elektroforeza hemoglobiny jest techniką laboratoryjną wykonywaną w celu identyfikacji różnych rodzajów hemoglobiny krążącej we krwi, umożliwiając identyfikację obecności chorób związanych z syntezą hemoglobiny. Rodzaj hemoglobiny jest identyfikowany za pomocą elektroforezy przy określonym pH, idealnie między 8,0 a 9,0, z weryfikowanym wzorem pasm, który można porównać do normalnego wzoru, umożliwiając identyfikację obecności nieprawidłowych hemoglobin.

Do czego jest przeznaczony: Elektroforeza hemoglobiny jest wykonywana w celu zbadania i zdiagnozowania chorób związanych z syntezą hemoglobiny, takich jak niedokrwistość sierpowatokrwinkowa i choroba hemoglobiny C, a także jest przydatna w różnicowaniu talasemii. Dowiedz się, jak interpretować elektroforezę hemoglobiny.

2. Elektroforeza białek

Elektroforeza białkowa to badanie zlecone przez lekarza w celu oceny ilości białek krążących we krwi, a tym samym w celu identyfikacji chorób. Badanie to wykonuje się z próbki krwi, która jest odwirowywana w celu uzyskania osocza, przy czym część krwi składa się, między innymi, z białek.

Po elektroforezie można zwizualizować wzór prążków, a następnie wykres, na którym wskazana jest ilość każdej frakcji białek, która ma podstawowe znaczenie dla diagnozy.

Do czego jest przeznaczony: Elektroforeza białkowa pozwala lekarzowi zbadać występowanie szpiczaka mnogiego, odwodnienie, marskość wątroby, zapalenie, chorobę wątroby, zapalenie trzustki, tocznia i nadciśnienie tętnicze zgodnie ze wzorem pasma i wykresem przedstawionym w raporcie z badania.

Dowiedz się, jak to się robi i jak zrozumieć wynik elektroforezy białek.